.2 治疗方法B-ALL 的治疗方案:①诱导阶段VDLP(长春新碱、柔红霉素、左旋门冬酰胺酶、地塞米松);②巩固治疗CAT(环磷酰胺、阿糖胞苷、6-巯基嘌呤);
③髓外白血病防治采用HDMTX(大剂量甲氨喋呤);④早期强化同诱导及巩固治疗方案,加鬼臼噻吩苷(VM26)或足叶乙苷(VP16);
⑤维持治疗用甲氨喋呤、6-巯基嘌呤、泼尼松、长春新碱。当发现MRD 阳性后的治疗在原化疗基础上加强化疗强度。药物包括去甲柔红霉素、大剂量阿糖胞苷、大剂量左旋门冬酰胺酶。
1.3 实验材料CD38- FITC、CD21- FITC、CD65-FITC、CD56 - FITC、KOR- SA3544 - FITC、CD33 -FITC 以及CD10 - PE、anti - TDT- FITC 和CD34 -percp、CD19- APC、CD15- FITC、CD45- FITC 分别购自美国BD 公司、法国Immunotech 公司及丹麦的Dako 公司等 1.4 方法抗体组合的筛选B-ALL 儿童的骨髓标本用Ficoll 分离单个核细胞,PBSA 洗2 遍,PBSA悬浮调节每管细胞数(2 ~3)×105,分别用CD38、CD45、CD56、CD65、CD66、CD15、CD21、CD22、CD33、CD13 等单抗10 μl 对表面抗原进行单色的直接标记检测,抗原表达符合以下变化者进行进一步四色抗体组合检测,CD38、CD45 弱表达;
CD58、CD65、CD66、CD21、CD22 强表达;CD34、与cu 同时表达,跨系抗原或与染色体异常相关原CD56、CD15、CD13、CD33、CD66 表达。
抗原表达如不符合以上变化者,则表示该指标不适用对该患儿进行监测 1.5 上机检测测定前先用标准荧光微球校准仪器,用CellQuest 软件(Version3.2)进行收集,不同的抗体组合及不同的患儿标本都用同一设定条件检测收集每管中的全部细胞,然后用CellQuest 软件(Version3.2)分析。
在双参数点图上,能使白血病细胞群出现的位置明显不同于正常骨髓细胞的位置,并且无重叠现象的抗体组合为有效组合 1.6 MRD 监测MRD 测试点:本研究选择了5 个MRD 测试点,分别为诱导缓解后(治疗后30 d)、巩固治疗前(治疗后60 d)、再诱导治疗(治疗后120 d)。
维持治疗中每半年测试1 次。患儿骨髓标本经以上处理后分析时如果在筛选时白血病细胞出现的区域仍有细胞存在,即为MRD 阳性,以这些细胞占骨髓单个核细胞总数的比例为MRD 的数值[3]。
,.2 治疗方法B-ALL 的治疗方案:①诱导阶段VDLP(长春新碱、柔红霉素、左旋门冬酰胺酶、地塞米松);②巩固治疗CAT(环磷酰胺、阿糖胞苷、6-巯基嘌呤);
③髓外白血病防治采用HDMTX(大剂量甲氨喋呤);④早期强化同诱导及巩固治疗方案,加鬼臼噻吩苷(VM26)或足叶乙苷(VP16);
⑤维持治疗用甲氨喋呤、6-巯基嘌呤、泼尼松、长春新碱。当发现MRD 阳性后的治疗在原化疗基础上加强化疗强度。药物包括去甲柔红霉素、大剂量阿糖胞苷、大剂量左旋门冬酰胺酶。
1.3 实验材料CD38- FITC、CD21- FITC、CD65-FITC、CD56 - FITC、KOR- SA3544 - FITC、CD33 -FITC 以及CD10 - PE、anti - TDT- FITC 和CD34 -percp、CD19- APC、CD15- FITC、CD45- FITC 分别购自美国BD 公司、法国Immunotech 公司及丹麦的Dako 公司等 1.4 方法抗体组合的筛选B-ALL 儿童的骨髓标本用Ficoll 分离单个核细胞,PBSA 洗2 遍,PBSA悬浮调节每管细胞数(2 ~3)×105,分别用CD38、CD45、CD56、CD65、CD66、CD15、CD21、CD22、CD33、CD13 等单抗10 μl 对表面抗原进行单色的直接标记检测,抗原表达符合以下变化者进行进一步四色抗体组合检测,CD38、CD45 弱表达;
CD58、CD65、CD66、CD21、CD22 强表达;CD34、与cu 同时表达,跨系抗原或与染色体异常相关原CD56、CD15、CD13、CD33、CD66 表达。
抗原表达如不符合以上变化者,则表示该指标不适用对该患儿进行监测 1.5 上机检测测定前先用标准荧光微球校准仪器,用CellQuest 软件(Version3.2)进行收集,不同的抗体组合及不同的患儿标本都用同一设定条件检测收集每管中的全部细胞,然后用CellQuest 软件(Version3.2)分析。
在双参数点图上,能使白血病细胞群出现的位置明显不同于正常骨髓细胞的位置,并且无重叠现象的抗体组合为有效组合 1.6 MRD 监测MRD 测试点:本研究选择了5 个MRD 测试点,分别为诱导缓解后(治疗后30 d)、巩固治疗前(治疗后60 d)、再诱导治疗(治疗后120 d)。
维持治疗中每半年测试1 次。患儿骨髓标本经以上处理后分析时如果在筛选时白血病细胞出现的区域仍有细胞存在,即为MRD 阳性,以这些细胞占骨髓单个核细胞总数的比例为MRD 的数值[3]。
Copyright © 2025 51zyzy.com All Rights Reserved.
京ICP备2021018588号-7 联系我们:3822031469@qq.com