乙酰胆碱对心脏的作用是扩张血管所以导致血压短暂下降，反射性心率加快。大剂量的乙酰胆碱也可以使心率减慢，此作用称为负性频率作用。
负性传导作用，可以减慢房室结和浦肯野纤维传导。负性肌力作用，可以减弱心肌收缩力。
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