维生素c含量的测定

一、目的与要求：1、掌握2．6二氯酚靛酚测定维生毒C的原理和方法。二、原理：还原型抗坏血酸能还原染料2.6二氯酚靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。

还原型抗坏血酸还原2.6二氯酚靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2.6二氯酚靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。

三、试剂(1)2％草酸溶液：溶解20克草酸结晶于200毫升水中，然后稀释至1000ml(2)1％草酸溶液：取上述2％草酸溶液500ml，用水稀释至1000m1(3)抗坏血酸标准溶液：准确称取20mg抗坏血酸，溶于1％草酸溶液中，移入lOml量瓶中，并用1％草酸溶液稀释至100毫升，混匀，置冰箱中保存。

使用时吸取上述抗坏血酸5ml，置于50毫升容量瓶中，用1％草酸溶液定容之。此标准使用液每毫升含0.02mg维生素C。

标定：吸取标准使用液5m1于三角烧瓶中，加入6％碘化钾溶液0.5ml，1％淀粉溶液3滴，再以0.001N碘酸钾标准溶液滴定，终点为淡蓝色。

计算如下：抗坏血酸浓度（mg/ml）=(V1×0.088)/V2式中：V1滴定时所耗0.001N碘酸钾标准溶液的量(ml)V2所取抗坏血酸的量(ml)0.088lmlO.0001N碘酸钾标准溶液相当于抗坏血酸的量(mg／m1(4)2.6：二氯靛酚溶液：称取碳酸氢钠52mg，溶于200ml沸水中，然后称取2.6二氯靛酚50mg，溶解在上述碳酸氢钠的溶液中，待冷，置于冰箱中过夜，次日过滤置于250ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

此液应贮于棕色瓶中并冷藏，每星期至少标定1次。标定方法：取5m1已知浓度的抗坏血酸标准溶液，加入1％草酸溶液5ml，摇匀，用上述配制的染料溶液滴定至溶液呈粉红色于15秒不褪色为止计算如下：每毫升染料溶液相当于Vc的毫克数=滴定度(T)=(C×V1)/V2式中：C抗坏血酸(V)的浓度(mg／m1)Vl抗坏血酸的量(m1)V2消耗染料溶液量(m1(5)0.1N碘酸钾溶液：精确取干燥的碘酸钾0.100ml。

0.3567克用水稀释至100ml(6)0.001N碘酸钾溶液：吸取0.1N碘酸钾溶液1ml，用水稀释至100毫升。

此溶液1ml相当于抗坏血酸0.088mg(7)1％淀粉溶液(8)6％碘化钾溶液。四、操作方法：1、称取适量(50.0100.0克)样品，加等量的2％草酸溶液，倒入组织捣碎机中捣成匀浆。

称取10.0030.00克浆状样品(使其含有抗坏血酸15mg，置于小烧杯中，用1％草酸溶液将样品移入100毫升容量瓶中，并稀释至刻度，摇匀。

2、将样液过滤，弃去最初毫升滤液。若样液具有颜色，用白陶土(应选择脱色力强但对抗坏血酸无损失的白陶土)去色，然后迅速吸取5lOml滤液，置于50ml三角烧瓶中，用标定的2.6二氯靛酚染料溶液滴定之,直至溶液呈粉红色于15秒内不褪色为止。

计算：每百克样品中抗坏血酸毫克数＝(V.T)/W×100式中：V滴定时所耗去染料溶液的量(ml；Tlml染料溶液相当于抗坏血酸标准溶液的量(mg)W滴定时所取的滤液中含样品量(g)．五、说明(1)所有试剂配制最好用重蒸馏水(2)样品取样后，应浸泡在已知量2％草酸溶液中使抗坏血酸受损失。

以免发生氧化，使抗坏血酸受损失(3)对动性的样品可用10％三氯醋酸代替2％草酸溶液提取；对含有大量Fe的样品，如储藏过久的罐头食品可用8％醋酸